МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ
Дослідження проводилося на птахівничій фермі TaqTaq і проєкті інкубаторію/компанія Kosar/Koya-Erbil, випробування розпочалося 13/10/2021 та завершилося 17/11/2021, усі яйця інкубувалися в цьому інкубаторі з використанням інтегрованої системи. Бактеріальна культура інкубувалася в сільськогосподарському коледжі лабораторії харчової промисловості Університету Салахаддіна в регіоні Курдистан, Ірак. Загалом було зібрано 6300 інкубаційних яєць від батьківського стада бройлерів Ross 308 у віці 58 тижнів. Збір яєць проводився 5 разів протягом дня. Яйця, які мали видиме забруднення фекаліями, послідом або яйцями, не використовувалися для експерименту.
ПІДГОТОВКА ОРГАНІЧНИХ КИСЛОТ
Був обраний препарат БактерАктив, концентрат розчину органічних кислот. Він складається із синергічного поєднання органічних кислот (мурашиної, пропіонової, молочної) і фітохімічних речовин. Концентрований розчин розбавляли до співвідношення 1 мл до 1000 мл за допомогою невеликого шприца перед використанням. Воду кип'ятили до 100 °C, щоб усунути будь-яке бактеріальне або вірусне забруднення кінцевого розчину, потім давали охолонути до 43 °C перед додаванням концентрату БактерАктив.
ПРОЦЕДУРА ОБРОБКИ
Яйця інкубували протягом 18 днів за температури (37,8 °C) і відносної вологості 55%, потім виймали в день транспортування до інкубаторію і поміщали в очищене і продезінфіковане приміщення з температурою 32 °C, щоб уникнути тривалого теплового шоку. Під час експерименту використовувалися одноразові рукавички та одяг. Звичайну пляшку з розпилювачем і велику ванну очистили та продезінфікували перед використанням для зберігання розведеного розчину і води з температурою 42 °C. Протягом цього періоду транзакції яйця були підготовлені до обприскування. Яйця були розділені на 7 груп, у кожній групі було 885 яєць, а в трьох було 295 яєць. Перша група контролю T1 не піддавалася обробці. Після першої групи другу групу T2 обприскували тільки водою, а потім давали їм висохнути на повітрі. У той час як яйця третьої групи T3 занурювали в стерилізовану воду. Що стосується четвертої групи, яйця T4 занурювали і обприскували стерилізованою водою. У п'ятій групі T5 яйця занурювали в розбавлену органічну кислоту у співвідношенні 1 мл органічної кислоти на 1000 мл води. Шоста група T6 була обприскана розведеною органічною кислотою. Остання і сьома група T7 була занурена, а потім обприскана розведеною органічною кислотою. Після того, як всі яйця були висушені на повітрі і експеримент був завершений, яйця були переміщені в інкубаторій на 3 дні за (37,25 °C) і відносної вологості 65% до кінця 21 дня інкубації. Наприкінці інкубації було підраховано всіх живих і мертвих курчат, було визначено виводимість закладених і запліднених яєць, загальну ембріональну смертність, вибракуваних курчат і вагу курчат. Процедура взяття проб шкаралупи яєць на бактерії проводилася шляхом взяття мазків зі шкаралупи яєць чистими тампонами, а потім переносилася на агар з ксилозо-лізином і дезоксихолатом (XLD). Зразки крові збирали у курчат у віці 4 днів, кожен зразок (4,0 мл) збирали після забою 5 курчат із кожної групи. Зібрані зразки крові центрифугували за 1000 циклів/хвилину впродовж 20 хвилин, а сироватку зливали в асептично оброблені флакони та зберігали за температури -18°C, потім проводили аналіз титру антитіл до хвороби Ньюкасла (ND) та інфекційного бронхіту (IB), який вимірювали прямим ІФА Synbiotics (Biocheck - ELX 800). Усі дані аналізували з використанням CRD (Complete Randomize Design) компанією SAS (SAS, 2005), значущі відмінності між середніми значеннями лікування визначали за допомогою множинних рангових тестів Дункана на рівні 0,05 (Duncan, 1955).
РЕЗУЛЬТАТ ТА ОБГОВОРЕННЯ
У таблиці 1 показано результати відсотка ембріональної смертності. Загальна ембріональна смертність протягом 15-21 дня та 1-21 дня була значно (p≤0,01) нижчою, коли в якості розчину використовували препарат БактерАктив, порівняно з усіма контрольними групами, ці результати узгоджуються з (Khan et al., 2016) та (Toosi et al., 2016). У той час як T1 і T2 мали значно (p≤0,01) вищий рівень ембріональної смертності порівняно з іншими групами, що пов'язано з відсутністю захисту T1 та високим накопиченням вологи в групі T2 під час занурення у воду, той факт, що БактерАктив проникає у шкаралупу яйця та допомагає процесу перетравлення поживних речовин яйця, справив значний вплив на ембріональну структуру. Протягом періоду 15-21 дня ембріональна смертність була значно нижчою в групі T6 порівняно з іншими групами, в той час як T5, T7, T4 і T3 мали значно нижчий рівень смертності порівняно з T2 і T1. При цьому T1 мав найвищий рівень смертності.
Таблиця 1: Вплив занурення та обприскування інкубаційних яєць в органічні кислоти БактерАктив на ембріональну смертність
|
Обробка
|
Ембріональна загибель (%)
|
| |
(15-21) днів Всього (1-21) днів
|
|
T1 Контроль
|
3,50±0,51 a
|
10,00±1,08 a
|
|
T2 занурення у Воду
|
3,33±0,35 a
|
10.00±0.92 a
|
|
T3 обприскування Водою
|
2.00±0.21 b
|
6.67±0.47 b
|
|
T4 занурення-обприскування Вода
|
2.00±0.25 b
|
5.34±0.45 bc
|
|
T5 занурення БактерАктив
|
1.00±0.18 bc
|
5.00±0.33 bc
|
|
T6 обприскування БактерАктив
|
0.33±0.09 c
|
3.33±0.26 c
|
|
T7 занурення-обприскування БактерАктив
|
1.67±0.22 b
|
5.01±0.40 bc
|
|
S.L
|
**
|
**
|
У таблиці (2) показано вплив занурення та розпилення яєць в органічній кислоті на ознаки вилуплення курчат-бройлерів. Незапліднені яйця та рівень заплідненості не мають відношення до кінцевих результатів, оскільки експеримент проводили на 18-й день інкубації, результати кожного вилуплення запліднених яєць та вилуплення від загальної кількості яєць було значно (p≤0,01) збільшено в усіх групах, у яких застосовували органічні кислоти, порівняно з контрольними обробками, а найвищий відсоток був у T6. Ті самі результати були також отримані раніше. (Salahi et al., 2011). Значення вилуплення запліднених яєць показують, що T6 мав найкращий результат з погляду виводимості, за ним слідують T7 і T3, потім ідуть T2, T4 і T5 відповідно з найнижчою кількістю вилуплення запліднених яєць, отриманою в контрольній групі T1; ця зміна в рівні вилуплення пов'язана зі зменшенням твердості яєчної шкаралупи при нанесенні води на яєчну шкаралупу. Вищі результати виведення зумовлені спільним ефектом м'якості яєчної шкаралупи та органічних кислот, що запобігає накопиченню мікроорганізмів, як зазначено та підтверджено (Lee et al., 2015), а також вмістом кишкової палички у фекаліях, що був знижений під час згодовування курям-несучкам шкаралупи з органічними кислотами.
Таблиця (2): Вплив занурення та обприскування інкубаційних яєць концентратом препарату БактеАктив на показники інкубації
|
Обробка
|
Ознаки вилуплення (%) |
| |
|
Неплідні яйця |
|
Плодючість
|
Вилуплення запліднених яєць
|
Вилуплення
усіх яєць
|
|
T1
|
14.75±1.78 a
|
85.25±3.11 c
|
86.46±3.51 c
|
75.41±2.78 c
|
|
T2
|
10.00±0.83 b
|
90.00±3.00 ab
|
92.00±3.66 ab
|
76.67±2.45 bc
|
|
T3
|
10.00±0.75 b
|
90.00±2.84 ab
|
90.74±2.94 b
|
81.67±2.33 b
|
|
T4
|
15.00±0.96 a
|
85.00±3.05 c
|
94.12±2.90 ab
|
80.00±2.65 b
|
|
T5
|
11.67±0.93 ab
|
88.33±2.33 b
|
94.34±3.11 ab
|
83.33±2.50 ab
|
|
T6
|
5.33±0.62 bc
|
94.67±2.45 a
|
96.54±3.50 a
|
88.67±2.15 a
|
|
T7
|
6.67±0.48 c
|
93.67±2.91 a
|
89.29±3.25 b
|
83.33±2.45 ab
|
|
S.L
|
**
|
**
|
|
|
Таблиця 3 показує результати ваги курчати, висоти та довжини гомілки курчати. Значення вимірювання безпосередньо після вилуплення. Результати вказують на те, що всі групи, до яких застосовувався концентрат БактерАктив, мали значно (p≤0,05) вищі значення, ніж усі контрольні групи. Вага курчати була (p≤0,05) найвищою у T6 та T5, ніж у всіх інших обробках відповідно, за якими слідував T7, у той час як T3 та T4 мали той самий значний рівень, при цьому T3 мав дещо вищу вагу, а T2 та T1 мали найнижчу вагу серед усіх обробок відповідно. Зазначено (Khan and Iqbal, 2016), що приріст ваги збільшується під час використання органічних кислот, в іншому дослідженні стверджується, що цей приріст ваги та розподіл зумовлені зниженням мікробного навантаження всередині яєць. Інше дослідження (Adil et al., 2011) не показало значного приросту ваги при використанні органічної кислоти. Що стосується довжини курчати, всі обробки, в яких застосовувалися органічні кислоти, показали значущі (p≤0,05) результати, за винятком T3, в якій була значуща довжина курчати, в той час як у контрольних групах T1 мала найкоротшу довжину курчати. Довжина гомілки курчати була найбільш значущою в обробках T6, T5 і T7, за якими слідували T3, T4 і T2 відповідно, при цьому T1 мав найнижче значення довжини гомілки.
Таблиця (3): Вплив занурення та обприскування інкубаційних яєць органічною кислотою (BakterActive) на курчат Вимірювання
|
Обробка
|
Якість циплят
|
| |
Вага циплят (г)
|
Довжина циплят (см)
|
Довжина гомілки курчат (см)
|
|
T1
|
44.2±1.48 b
|
17.5±0.89 b
|
2.17±0.38 b
|
|
T2
|
45.1±1.40 b
|
18.4±0.73 ab
|
2.40±0.33 ab
|
|
T3
|
46.2±1.33 ab
|
19.2±0.85 a
|
2.46±0.29 ab
|
|
T4
|
45.4±1.39 ab
|
18.6±0.71 ab
|
2.45±0.33 ab
|
|
T5
|
47.3±1.25 a
|
19.4±0.69 a
|
2.64±0.27 a
|
|
T6
|
48.4±1.32 a
|
19.8±0.65 a
|
2.73±0.23 a
|
|
T7
|
46.5±1.40 ab
|
19.5±0.77 a
|
2.60±0.25 a
|
|
S. L
|
*
|
*
|
*
|
Результати на графіку (1) ілюструють титр антитіл проти (ND) та (IB). Результати засвідчили позитивний ефект препарату БактерАктив на стимуляцію імунітету курчат за рахунок значного (p≤0,01) збільшення титру антитіл проти (ND) та (IB) у всіх трьох групах, де застосовувався концентрат (BacterActive), були вищі відповіді антитіл зі значним (p≤0,01) збільшенням титру антитіл порівняно з іншими контрольними групами. Це узгоджується з попередніми дослідженнями, які продемонстрували, що використання органічних кислот посилювало специфічні імунні відповіді у бройлерів та курей-несучок (Ma et al., 2021). Титр антитіл у курчат був значно (p≤0,01) вищим у групі T6, ніж у всіх інших групах лікування, у яких використовувалась органічна кислота, за якою слідували T5, T7 відповідно, в той час як T3 і T4 мали також позитивний рівень антитіл, при цьому T3 мав трохи вищу відповідь, ніж T2, а T1 мав найнижчу відповідь титру антитіл серед усіх видів лікування відповідно. Помічено (Özek et al., 2011), що лише при додаванні органічної кислоти до ефірних олій титр антитіл підвищується у племінних курей-бройлерів, що узгоджується з поточними результатами. Інше дослідження (Marín-Flamand et al., 2013) показало, що імунна відповідь на суміш органічних кислот не мала істотного впливу на титр антитіл.
