МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование проводилось на птицеводческой ферме TaqTaq и проекте инкубатория / компания Kosar / Koya-Erbil, испытание началось 13/10/2021 и завершилось 17/11/2021., все яйца инкубировались в этом инкубаторе с использованием интегрированной системы. Бактериальная культура инкубировалась в сельскохозяйственном колледже лаборатории пищевой промышленности Университета Салахаддина в регионе Курдистан, Ирак. Всего было собрано 6300 инкубационных яиц от родительского стада бройлеров Ross 308 в возрасте 58 недель. Сбор яиц проводился 5 раз в течение дня. Яйца, которые имели видимое загрязнение фекалиями, пометом или яйцами, не использовались для эксперимента.
ПОДГОТОВКА ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ
Был выбран препарат БактерАктив, концентрат раствора органических кислот. Он состоит из синергического сочетания органических кислот (муравьиной, пропионовой, молочной) и фитохимических веществ. Концентрированный раствор разбавлялся до соотношения 1 мл к 1000 мл с помощью небольшого шприца перед использованием. Воду кипятили до 100 °C, чтобы устранить любое бактериальное или вирусное загрязнение конечного раствора, затем давали остыть до 43 °C перед добавлением концентрата БактерАктив.
ПРОЦЕДУРА ОБРАБОТКИ
Яйца инкубировали в течение 18 дней при температуре (37,8 °C) и относительной влажности 55%, затем вынимали в день транспортировки в инкубаторий и помещали в очищенное и продезинфицированное помещение с температурой 32 °C, чтобы избежать длительного теплового шока. Во время эксперимента использовались одноразовые перчатки и одежда. Обычная бутылка с распылителем и большая ванна были очищены и продезинфицированы перед использованием для хранения разбавленного раствора и воды с температурой 42 °C. В течение этого периода транзакции яйца были подготовлены к опрыскиванию. Яйца были разделены на 7 групп, в каждой группе было 885 яиц, а в трех было 295 яиц. Первая группа контроля T1 не подвергалась обработке. После первой группы вторую группу T2 опрыскивали только водой, а затем давали им высохнуть на воздухе. В то время как яйца третьей группы T3 погружали в стерилизованную воду. Что касается четвертой группы, яйца T4 погружали и опрыскивали стерилизованной водой. В пятой группе T5 яйца были погружены в разбавленную органическую кислоту в соотношении 1 мл органической кислоты на 1000 мл воды. Шестая группа T6 была опрыскана разбавленной органической кислотой. Последняя и седьмая группа T7 была погружена, а затем опрыскана разбавленной органической кислотой. После того, как все яйца были высушены на воздухе и эксперимент был завершен, яйца были перемещены в инкубаторий на 3 дня при (37,25 °C) и относительной влажности 65% до конца 21 дня инкубации. В конце инкубации были подсчитаны все живые и мертвые цыплята, были определены выводимость заложенных и оплодотворенных яиц, общая эмбриональная смертность, выбракованные цыплята и вес цыплят. Процедура взятия проб скорлупы яиц на бактерии проводилась путем взятия мазков со скорлупы яиц чистыми тампонами, а затем переносилась на агар с ксилозо-лизином и дезоксихолатом (XLD). Образцы крови собирали у цыплят в возрасте 4 дней, каждый образец (4,0 мл) собирали после забоя 5 цыплят из каждой группы. Собранные образцы крови центрифугировали при 1000 циклов/минуту в течение 20 минут, а сыворотку сливали в асептически обработанные флаконы и хранили при температуре -18°C, затем проводили анализ титра антител к болезни Ньюкасла (ND) и инфекционному бронхиту (IB), измеряемого прямым ИФА Synbiotics (Biocheck – ELX 800). Все данные анализировали с использованием CRD (Complete Randomize Design) компанией SAS (SAS, 2005), значимые различия между средними значениями лечения определяли с помощью множественных ранговых тестов Дункана на уровне 0,05 (Duncan, 1955).
РЕЗУЛЬТАТ И ОБСУЖДЕНИЕ
В таблице 1 показаны результаты процента эмбриональной смертности. Общая эмбриональная смертность в течение 15–21 дня и 1–21 дня была значительно (p≤0,01) ниже, когда в качестве раствора использовался препарат БактерАктив по сравнению со всеми контрольными группами, эти результаты согласуются с (Khan et al., 2016) и (Toosi et al., 2016). В то время как T1 и T2 имели значительно (p≤0,01) более высокий уровень эмбриональной смертности по сравнению с другими группами, это связано с отсутствием защиты T1 и высоким накоплением влаги в группе T2 при погружении в воду, тот факт, что БактерАктив проникает в скорлупу яйца и помогает процессу переваривания питательных веществ яйца, оказал значительное влияние на эмбриональную структуру. В течение периода 15-21 дня эмбриональная смертность была значительно ниже в группе T6 по сравнению с другими группами, в то время как T5, T7, T4 и T3 имели значительно более низкий уровень смертности по сравнению с T2 и T1. При этом T1 имел самый высокий уровень смертности.
Таблица 1: Влияние погружения и опрыскивания инкубационных яиц в органические кислоты БактерАктив на эмбриональную смертность
|
Обработка
|
Эмбриональная гибель (%)
|
| |
(15-21) дней
|
Всего (1-21) дней
|
|
T1 Контроль
|
3,50±0,51 a
|
10,00±1,08 a
|
|
T2 погружение Вода
|
3,33±0,35 a
|
10.00±0.92 a
|
|
T3 опрыскивание Вода
|
2.00±0.21 b
|
6.67±0.47 b
|
|
T4 погружение-опрыскивание Вода
|
2.00±0.25 b
|
5.34±0.45 bc
|
|
T5 погружение БактерАктив
|
1.00±0.18 bc
|
5.00±0.33 bc
|
|
T6 опрыскивание БактерАктив
|
0.33±0.09 c
|
3.33±0.26 c
|
|
T7 погружение-опрыскивание БактерАктив
|
1.67±0.22 b
|
5.01±0.40 bc
|
|
S.L
|
**
|
**
|
В таблице (2) показано влияние погружения и распыления яиц в органической кислоте на признаки вылупления цыплят-бройлеров. Неоплодотворенные яйца и уровень оплодотворенности не имеют отношения к конечным результатам, поскольку эксперимент проводился на 18-й день инкубации, результаты каждого вылупления оплодотворенных яиц и вылупление от общего числа яиц были значительно (p≤0,01) увеличены во всех группах, в которых применялись органические кислоты, по сравнению с контрольными обработками, а самый высокий процент был в T6. Те же результаты были также получены ранее. (Salahi et al., 2011). Значения вылупления оплодотворенных яиц показывают, что T6 имел наилучший результат с точки зрения выводимости, за ним следуют T7 и T3, затем идут T2, T4 и T5 соответственно с самым низким количеством вылупления оплодотворенных яиц, полученным в контрольной группе T1; это изменение в уровне вылупления связано с уменьшением твердости яичной скорлупы при нанесении воды на яичную скорлупу. Более высокие результаты вывода обусловлены совместным эффектом мягкости яичной скорлупы и органических кислот, предотвращающей накопление микроорганизмов, как указано и подтверждено (Lee et al., 2015), а также содержанием кишечной палочки в фекалиях, которое было снижено при скармливании курам-несушкам скорлупы с органическими кислотами.
Таблица (2): Влияние погружения и опрыскивания инкубационных яиц концентратом препарата БактеАктив на показатели инкубации
|
Обработка
|
Признаки вылупления (%)
|
| |
Неплодородные яйца
|
Плодовитость
|
Вылупление
оплодотворенных яиц
|
Вылупление
всех яиц
|
|
T1
|
14.75±1.78 a
|
85.25±3.11 c
|
86.46±3.51 c
|
75.41±2.78 c
|
|
T2
|
10.00±0.83 b
|
90.00±3.00 ab
|
92.00±3.66 ab
|
76.67±2.45 bc
|
|
T3
|
10.00±0.75 b
|
90.00±2.84 ab
|
90.74±2.94 b
|
81.67±2.33 b
|
|
T4
|
15.00±0.96 a
|
85.00±3.05 c
|
94.12±2.90 ab
|
80.00±2.65 b
|
|
T5
|
11.67±0.93 ab
|
88.33±2.33 b
|
94.34±3.11 ab
|
83.33±2.50 ab
|
|
T6
|
5.33±0.62 bc
|
94.67±2.45 a
|
96.54±3.50 a
|
88.67±2.15 a
|
|
T7
|
6.67±0.48 c
|
93.67±2.91 a
|
89.29±3.25 b
|
83.33±2.45 ab
|
|
S.L
|
**
|
**
|
|
|
Таблица 3 показывает результаты веса цыпленка, высоты и длины голени цыпленка. Значения измерения непосредственно после вылупления. Результаты указывают на то, что все группы, к которым применялась концентрат БактерАктив, имели значительно (p≤0,05) более высокие значения, чем все контрольные группы. Вес цыпленка был (p≤0,05) самым высоким в T6 и T5, чем во всех других обработках соответственно, за которыми следовал T7, в то время как T3 и T4 имели тот же значительный уровень, при этом T3 имел немного более высокий вес, а T2 и T1 имели самый низкий вес среди всех обработок соответственно. Отмечено (Khan and Iqbal, 2016), что прирост веса увеличивается при использовании органических кислот, в другом исследовании утверждается, что этот прирост веса и распределение обусловлены снижением микробной нагрузки внутри яиц. Другое исследование (Adil et al., 2011) не показало значительного прироста веса при использовании органической кислоты. Что касается длины цыпленка, все обработки, в которых применялись органические кислоты, показали значимые (p≤0,05) результаты, за исключением T3, в которой была значимая длина цыпленка, в то время как в контрольных группах T1 имела самую короткую длину цыпленка. Длина голени цыпленка была наиболее значимой в обработках T6, T5 и T7, за которыми следовали T3, T4 и T2 соответственно, при этом T1 имел самое низкое значение длины голени.
Таблица (3): Воздействие погружения и опрыскивания инкубационных яиц органической кислотой (BakterActive) на цыплят Измерения
|
Обработка
|
Качество цыплят
|
| |
Вес цыплят (г)
|
Длина цыплят (см)
|
Длина голени цыплят (см)
|
|
T1
|
44.2±1.48 b
|
17.5±0.89 b
|
2.17±0.38 b
|
|
T2
|
45.1±1.40 b
|
18.4±0.73 ab
|
2.40±0.33 ab
|
|
T3
|
46.2±1.33 ab
|
19.2±0.85 a
|
2.46±0.29 ab
|
|
T4
|
45.4±1.39 ab
|
18.6±0.71 ab
|
2.45±0.33 ab
|
|
T5
|
47.3±1.25 a
|
19.4±0.69 a
|
2.64±0.27 a
|
|
T6
|
48.4±1.32 a
|
19.8±0.65 a
|
2.73±0.23 a
|
|
T7
|
46.5±1.40 ab
|
19.5±0.77 a
|
2.60±0.25 a
|
|
S. L
|
*
|
*
|
*
|
Результаты на графике (1) иллюстрируют титр антител против (ND) и (IB). Результаты показали положительный эффект препарата БактерАктив на стимуляцию иммунитета цыплят за счет значительного (p≤0,01) увеличения титра антител против (ND) и (IB) во всех трех группах, где применялся концентрат (BacterActive), были более высокие ответы антител со значительным (p≤0,01) увеличением титра антител по сравнению с другими контрольными группами. Это согласуется с предыдущими исследованиями, которые продемонстрировали, что использование органических кислот усиливало специфические иммунные ответы у бройлеров и кур-несушек (Ma et al., 2021). Титр антител у цыплят был значительно (p≤0,01) самым высоким в группе T6, чем во всех других группах лечения, в которых использовалась органическая кислота, за которой следовали T5, T7 соответственно, в то время как T3 и T4 имели также позитивный уровень антител, при этом T3 имел немного более высокий ответ, чем T2, а T1 имел самый низкий ответ титра антител среди всех видов лечения соответственно. Замечено (Özek et al., 2011), что только при добавлении органической кислоты к эфирным маслам титр антител повышается у племенных кур-бройлеров, что согласуется с текущими результатами. Другое исследование (Marín-Flamand et al., 2013) показало, что иммунный ответ на смесь органических кислот не оказал существенного влияния на титр антител.
